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上海晶抗生物教您如何正確選擇試劑盒
更新時(shí)間:2023-04-11   點(diǎn)擊次數(shù):1181次

要問科研怕遇到的糟心事,非買到科研試劑莫屬了,用試劑無(wú)非導(dǎo)致兩種結(jié)果:實(shí)驗(yàn)失敗or被動(dòng)學(xué)術(shù)造假。ELISA試劑盒門檻較低,制假相對(duì)簡(jiǎn)單,常有不法商家打著種屬全、指標(biāo)全、現(xiàn)貨供應(yīng)的旗號(hào)來(lái)生產(chǎn)、銷售ELISA試劑盒,曾有老師吐槽“每個(gè)月都能收到好幾個(gè)從未聽過(guò)的廠商向我展示ELISA試劑盒"。針對(duì)ELISA試劑盒真假問題,我們整理了一些辨別經(jīng)驗(yàn)(購(gòu)買前and購(gòu)買后),希望對(duì)大家有所幫助!

購(gòu) 買 前:

1.選擇正規(guī)公司

國(guó)產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè),比如晶抗生物。將“廠家名"、“ELISA試劑等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會(huì)有打假曝光平臺(tái)。正規(guī)廠商的ELISA試劑盒通常有技術(shù)發(fā)明支撐和ISO9001國(guó)際質(zhì)量體系認(rèn)證,且廠家會(huì)定期收集整理試劑盒的文獻(xiàn)引用情況,購(gòu)買前可向廠家索要相關(guān)材料加以核實(shí)。

2.試劑盒性能參數(shù)

向廠家索要或從其下載產(chǎn)品說(shuō)明書和質(zhì)控報(bào)告,查找ELISA試劑盒的關(guān)鍵質(zhì)控性能參數(shù):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。如果無(wú)法提供這些性能參數(shù)數(shù)據(jù),則說(shuō)明試劑盒開發(fā)過(guò)程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),并未做試劑盒性能測(cè)試從而無(wú)法得到準(zhǔn)確真實(shí)的結(jié)果,也有極大可能是假貨試劑盒。

3. 不常見指標(biāo)的選擇

如需檢測(cè)不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或ELISA試劑盒供應(yīng)商。其實(shí),“貨比三家"有時(shí)會(huì)有一些“驚喜",也許你會(huì)發(fā)現(xiàn):某個(gè)公司的說(shuō)明書除了指標(biāo)名稱不一致,其他內(nèi)容基本一樣;某個(gè)指標(biāo),幾家公司試劑盒的性能參數(shù)一樣…一定要記住:關(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標(biāo)ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹(jǐn)慎也不為過(guò)。

4. 所有指標(biāo)常備現(xiàn)貨

抗體并不十分穩(wěn)定,針對(duì)非熱門研究指標(biāo),廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會(huì)長(zhǎng)期備現(xiàn)貨,若承諾相對(duì)冷門的ELISA試劑盒能隨時(shí)發(fā)貨,那需謹(jǐn)慎考慮是否要選擇該供應(yīng)商。

購(gòu) 買 后:

1.檢查

檢查說(shuō)明書、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。

2.實(shí)驗(yàn)

① 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原

a. 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;

b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體;

c. 后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物;

d. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;

e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)線性,則說(shuō)明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用,則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。

② 如果購(gòu)買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假

a. 取出購(gòu)買的試劑盒A的包被板兩條;

b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;

c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;

d. 后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物;

e. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,無(wú)則反之。

f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測(cè)A,不能檢測(cè)B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。


上海晶抗生物工程有限公司

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